ABSTRACT
A criptococose é uma micose sistêmica adquirida pela inalação de basidiosporos ou leveduras desidratadas de Cryptococus neoformans e Cryptococus gattii, estas duas espécies podem causar criptococose oportunista e primária respectivamente. C. neoformans está constituído de tipos moleculares VNI-VNIV e C. gattii de VGI-VGIV que apresentam distribuição geográfica diferenciada, como por exemplo, o tipo VNI é cosmopolita e está associado a AIDS e VGI predominando na Austrália e EUA, o tipo VGII predominando no Brasil e America Latina. Este trabalho tem por objetivo realizar estudo comparado dos tipos moleculares VNI de C. neoformans, VGI e VGII de C. gattii analisando diferentes aspectos tais como: 1- Determinar o perfil da suscetibilidade in vitro da concentração inibitória mínima (CIM) de fluconazol (FLZ), itraconazol (ITZ), 5-fluorocitosina (5FC) e anfotericina B (AMB), isoladamente e de forma combinada de AMB com 5FC e AMB com Voriconazol (VRZ); 2- Determinar CIM pela citometria de fluxo (CMF) frente a FLZ, ITZ e AMB; 3- Definir a concentração mínima letal (CML) de AMB e 5FC, isoladamente e em combinação; 4- Avaliar a ação da melanina frente a 5FC e AMB na forma combinada e isolada de 5FC; 5- Induzir a resistência in vitro para FLZ e padronizar os fluorocromos: acetoximetil - calceína (calceina-AM), acetoximetil - 2, 7 -bis-(2-carboxietil)-5-(e -6)- carboxifluoresceína (BCECF-AM), rodamina 123 (Rh123) e iodeto de 3, 3 dipentiloxacarbocianina (DiOC5) na CMF para verificar a expressão de bombas de efluxo; 6- Comparar a expressão de bombas de efluxo...
Cryptococcosis is a systemic mycosis acquired by inhalation of dried yeasts or basidiospores of Cryptococus neoformans and Cryptococus gattii, these species can cause cryptococcosis opportunistic and primary respectively. C. neoformans is composed of molecular types VNI - VNIV and C. gattii VGI - VGIV they have different geographical distribution, the VNI type is cosmopolitan and is associated with AIDS, VGI type is predominant in Australia and the USA; while VGII type occurs in Brazil and Latin America. This paper aims to conduct a comparative study of the molecular types VNI C. neoformans and VGI, VGII C. gattii analyzing different aspects such as: 1 The susceptibility profile in vitro of fluconazole ( FLZ ), itraconazole ( ITZ ), 5 - fluorocytosine ( 5FC ) and amphotericin B ( AMB ) alone and in combination with 5FC and AMB with voriconazole ( VRZ ) 2 The minimum inhibitory concentration ( MIC ) by flow cytometry ( FCM ) comparing MIC of FLZ, ITZ and AMB with CLSI; 3 - The minimum lethal concentration ( MLC ) of AMB and 5FC, alone and in combination; 4 - The action of melanin against 5FC and AMB alone and combined 5FC, 5 The induced resistance in vitro to FLZ and standardize the fluorochromes: acetoximetil - calceína (calceina-AM), acetoximetil - 2, 7 -bis-(2-carboxietil)-5-(e -6)- carboxifluoresceína (BCECF-AM), rodamina 123 (Rh123) e iodeto de 3, 3 dipentiloxacarbocianina (DiOC5) in FCM to verify expression of efflux pumps; 6 - The compare the expression of efflux pumps...
Subject(s)
Animals , Cryptococcosis/epidemiology , Cryptococcosis/drug therapy , Cryptococcus gattii/classification , Cryptococcus neoformans/classification , Drug Resistance, Fungal , Cell Separation , Flow Cytometry , Molecular Typing , Mycological Typing TechniquesABSTRACT
A clear understanding of the pharmacodynamic properties of antifungal agents is important for the adequate treatment of fungal infections like candidiasis. For certain antifungal agents, the determination of Minimal Fungicidal Concentration (MFC) and time kill curve could be clinically more relevant than the determination of the Minimal Inhibitory Concentration (MIC). In this study, MIC and MFC to fluconazole, amphotericin B and caspofungin against C. albicans isolates and the killing patterns obtained with caspofungin and amphotericin B against susceptible and resistant strains to fluconazole were determined. The results of MICs showed that all C. albicans isolates were highly susceptible to amphotericin B, but two isolates were fluconazole resistant. The comparative analysis between MIC and MFC showed that MFC of fluconazole was fourfold higher than MIC in 41.9% of the C. albicans isolates. Same values of MFC and MIC of amphotericin B and caspofungin were found for 71% of the isolates. Correlation between time kill curves and MFC of amphotericin B and caspofungin against all 4 isolates tested was observed. The caspofungin killing effect was more evident at MFC in 6 hours of incubation than at MIC in this time, suggesting dependence of concentration. The similarity of results of time-kill curve and MFC values indicate that determination of MFC is an alternative for the detection of the fungicidal activity of these drugs.
Um claro entendimento das propriedades farmacodinâmicas dos agentes antifúngicos é de grande importância para o adequado tratamento das infecções fúngicas como a candidíase. Em alguns casos de escolha do agente antifúngico, a determinação da concentração fungicida minima (CFM) e a curva do tempo de morte podem ser mais clinicamente relevantes do que a concentração inibitória minima (CIM). Nesse estudo, foi avaliado a CIM e a CFM de fluconazol, anfotericina B e caspofungina em Candida albicans e ainda os padrões de morte obtidos com caspofungina e anfotericina B de isolados suscetíveis e resistentes ao fluconazol. Os resultados de CIM mostraram que todos os isolados de Candida albicans foram altamente suscetíveis à anfotericina B, entretanto dois isolados foram fluconazol resistentes. A análise comparativa de CIM e da CFM mostrou que o CFM de fluconazol foi quatro vezes superior à CIM para 41,9% dos isolados de Candida albicans. Valores iguais de CFM e CIM de anfotericina B e caspofungina foram encontrados para 71% dos isolados. Correlação entre a curva do tempo de morte e a CFM de anfotericina B e caspofungina contra quatro isolados testados foi observada. O efeito de morte de caspofungina foi mais evidente na CFM até 6 horas de incubação do que na CIM nesse mesmo tempo, sugerindo a dependência da concentração. A similaridade dos resultados da curva do tempo de morte e os valores de CFM indicam que a determinação da CFM é uma escolha alternativa na detecção da atividade fungicida destes agentes antifúngicos.